Cellrangerバーコード分析用の参照CSV ファイルを作成する方法

Cellrangerバーコード分析用の参照CSV ファイルを作成する方法

feature reference CSV は –feature-ref フラグを使用して cellranger count に渡され、実験で使用されるFeature Barcode reagentsのセットを宣言します。

このファイルは、使用される固有のFeature Barcodeごとに、フィーチャー名と識別子、この試薬に関連付けられた固有のFeature barcodeシーケンス、および読み取りシーケンスからFeature barcodeシーケンスを抽出する方法を示すパターンを宣言します。

Feature reference CSV ファイルの必須列

列名説明
IDこの機能の一意の ID。 空白文字、引用符、カンマ文字を含めることはできません。 各 ID は一意である必要があり、トランスクリプトームの遺伝子識別子と競合してはなりません。
nameこの機能の人間が判読できる名前。 空白を含めることはできません。 この名前はルーペブラウザに表示されます。
readどの RNA シーケンスリードにフィーチャーバーコードシーケンスが含まれるかを指定します。 R1 または R2 である必要があります。 注: ほとんどの場合、R2 が正しい読み取り値です。
pattern読み取りからフィーチャ バーコード シーケンスを抽出する方法を指定します。 詳細については、以下の「バーコード抽出パターン」セクションを参照してください。
sequenceこの機能に関連付けられたヌクレオチド バーコード シーケンス。例: 抗体バーコードまたは sgRNA プロトスペーサー配列。

例: 抗体キャプチャ バーコードの有効なFeature reference CSV ファイルは、次の表のようになります。

idnamereadpatternsequencefeature_type
CD3CD3_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNAACAAGACCCTTGAGAntibody Capture
CD4CD4_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNTACCCGTAATAGCGTAntibody Capture
CD8aCD8a_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNATTGGCACTCAGATGAntibody Capture
CD14CD14_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNGAAAGTCAAAGCACTAntibody Capture
CD15CD15_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNACGAATCAATCTGTGAntibody Capture
CD16CD16_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNGTCTTTGTCAGTGCAAntibody Capture
CD56CD56_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNGTTGTCCGACAATACAntibody Capture
CD19CD19_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNTCAACGCTTGGCTAGAntibody Capture
CD25CD25_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNGTGCATTCAACAGTAAntibody Capture
CD45RACD45RA_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNGATGAGAACAGGTTTAntibody Capture
CD45ROCD45RO_TotalSeqBR25PNNNNNNNNNN(BC)NNNNNNNNNTGCATGTCATCGGTGAntibody Captur

Feature reference CSV ファイルの作成の詳細については、以下のリンクも参照ください。https://support.10xgenomics.com/single-cell-gene-expression/software/pipelines/latest/using/feature-bc-analysis#feature-ref